1、儀器與試藥

BJ-2型崩解儀（天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備公司）；RCZ-8A型智能藥物溶出儀（天津大學(xué)精密儀器廠）； LC-10A 高效液相色譜儀（LC-10AD 泵，SPD-10AUV 檢測(cè)器，C-R7A 數(shù)據(jù)處理機(jī)），Shim-Pack-ODS

（6.0×150mm）柱；JL9200 激光粒度儀（濟(jì)南微納儀器有限公司）；葛根素對(duì)照品 （中國(guó)藥品生物制

品檢定所）；葛根藥材（購(gòu)于陜西鎮(zhèn)平縣醫(yī)藥公司），經(jīng)鑒定為豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi

的干燥根；SF-60 型普通粉碎機(jī)（常熟中藥制藥機(jī)械廠）；試驗(yàn)型微粉機(jī)甲醇、乙醇為分析純。

2、實(shí)驗(yàn)方法

2.1樣品制備

2.1.1葛根浸膏提取

取葛根粗粉850g，用85% 乙醇加熱回流提取三次，第一次加8倍量提取4小時(shí)，第二、三次各加

6倍量提取3小時(shí)，放出濾過(guò)，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32（70℃）放出即得。

2.1.2葛根細(xì)粉的制備及粒度分布檢查

細(xì)粉A：用普通粉碎機(jī)（羅底100目）將葛根片粉碎后再過(guò)200目細(xì)篩即得。

細(xì)粉B：每次取葛根片400g投進(jìn)微粉機(jī)粉碎13分鐘（此時(shí)間經(jīng)實(shí)驗(yàn)以100%過(guò)200目篩確定）放出即得。

粒度分布檢查：利用激光粒度儀對(duì)細(xì)粉A、細(xì)粉B的粒度（0.6～90µm）分布情況進(jìn)行了檢測(cè)。

2.1.3片劑制備（素片）

片A：取葛根（850g）提取浸膏與細(xì)粉A 150g混合干燥，粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基

纖維素混勻，用70% 乙醇潤(rùn)濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。

片B：取葛根（850g）提取浸膏與細(xì)粉B 150g 混合干燥，粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基

纖維素混勻，用70% 乙醇潤(rùn)濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。

2.2溶出度研究

2.2.1色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：甲醇-水（25∶75）；流速1ml·min-1；柱溫為室溫；

檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。

2.2.2崩解度測(cè)定

按《中國(guó)藥典》2000年版一部片劑通則項(xiàng)下崩解時(shí)限的檢驗(yàn)方法，取三批片A樣測(cè)得的崩解時(shí)限

分別為42±3min，44±2min，45±2min；取三批片B樣測(cè)得的崩解時(shí)限分別為43±3min，45±2min，

45±7min；均符合其規(guī)定。

2.2.3線性范圍

精密稱(chēng)取葛根素對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置10ml 量瓶中，用30%乙醇稀釋至刻度，在上述色譜條件下測(cè)定葛根素

色譜峰面積。以濃度C為橫坐標(biāo),峰面積A為縱坐標(biāo)，按最小二乘法進(jìn)行線性回歸, 得回歸方程C=7.92

×10-2A – 1.86×10-1,r=0.9992，葛根素含量在20～200µg·ml-1線性關(guān)系良好。

2.2.4樣品中葛根素含量測(cè)定

取愈風(fēng)寧心片10片（素片)，精密稱(chēng)定，研細(xì)，取細(xì)粉約50mg，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精

密加入30%乙醇50ml，閉塞稱(chēng)定重量，超聲處理20min，稱(chēng)定重量，用30%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖

勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作供試品溶液；取供試品溶液10µl，進(jìn)樣測(cè)定，得片A的含量為13.62mg/片(n=3)，

片B的含量為17.43mg/片（n=3）。

2.2.5溶出度測(cè)定

按照《中國(guó)藥典》2000年版二部溶出度測(cè)定方法中的第一法測(cè)定，以水為釋放介質(zhì)，每只轉(zhuǎn)籃中

放置3片，測(cè)得的溶出量為平均溶出量；轉(zhuǎn)速為100r.min-1，平行對(duì)片A、片B各測(cè)6組。

3、結(jié)果

3.1細(xì)粉A、細(xì)粉B的粒度分布測(cè)試結(jié)果

表1  細(xì)粉A的粒度分布情況

   序號(hào)   粒度（um）  體積%    累積%    序號(hào)   粒度（um）   體積%    累積%                                                        

1     0.6-1.2      0.000      0.00      15     27-30        2.302      14.59

2     1.2-3.0      0.000      0.00      16     30-34        2.532      17.12

3     3.0-4.5      0.006      0.01      17     34-38        3.276      20.40

4     4.5-6.2      0.372      0.38      18     38-42        3.757      24.16

5     6.2-7.6      0.534      0.91      19     42-46        4.102      28.26

6     7.6-9.2      0.802      1.71      20     46-50        4.306      32.57

7     9.2-11.4     0.871      2.58      21     50-54        4.402      36.97

8    11.4-12.8     1.089      3.67      22     54-58        4.688      41.66

9    12.8-14.2     1.102      4.77      23     58-62        10.372     52.03

   10    14.2-15.8     1.123      5.89      24     62-66        14.249     66.28

   11    15.8-17       1.151     7.04       25     66-70        17.901     84.18

   12    17-20        1.301     8.34       26     70-75        15.618     99.80

   13    20-24        1.682     10.02      27     75-80        0.201      100.00

   14    24-27        2.266     12.29      28     80-90        0.000      100.00          

表2  細(xì)粉B的粒度分布情況

  序 號(hào)   粒度（um）  體積%    累積%      序 號(hào)     粒度（um）  體積%    累積%                                                        

1     0.6-0.9      0.000     0.00         15       14-17         5.167    32.32

2     0.9-1.3      1.824     1.82         16       17-20        6.079     38.40

3     1.3-2.0      3.445     5.27         17       20-24        6.890     45.29

4     2.0-2.5      1.216     6.48         18       24-28        7.599     52.89

5     2.5-3.2      0.810     7.29         19       28-32        7.801     60.69

6     3.2-4.0      1.014     8.31         20       32-36        7.497     68.19

7     4.0-5.2      1.419     9.73         21       36-40        7.36      75.58

8     5.2-6.0      0.912     10.64        22       40-45        7.194     82.78

9     6.0-6.8      1.216     11.85        23       45-52        6.687     89.46

10    6.8-7.7      1.722     13.58        24       52-60        5.268     94.73

11    7.7-8.7      2.330     15.91        25       60-70        3.445     98.18

12    8.7-9.9      3.040     18.95        26       70-75        1.732     99.91

13    9.9-12      3.749     22.70        27       75-80        0.089     100.00

14    12-14       4.458     27.15        28       80-90       0.000      100.00                                              

注：200目篩孔內(nèi)徑為75μm，300目篩孔內(nèi)徑為47μm，5μm相當(dāng)于2000目。

3.2溶出度測(cè)定結(jié)果

表3  愈風(fēng)寧心片累積溶出率(%)

       時(shí)間/min      A          B       時(shí)間/min      A            B

        10        3.2±1.6    6.5±7.2    40       42.9±1.5   71.3±1.4

        15        7.8±8.1   16.2±1.4    45       56.2±2.3    82.4±1.8

        20       11.5±5.3   26.7±2.1    50       62.1±5.6    91.6±4.1

        25       17.8±4.3   34.2±1.7    55       66.8±7.5    93.2±5.8

        30       24.6±6.1   45.6±8.2    60       69.6±6.4    96.8±5.2

        35       31.4±2.6   56.4±5.2          

注：n=6

3.3片A、片B溶出度比較

表4  愈風(fēng)寧心片溶出度比較

樣  品                  T50/min             P

A                    43.2±6.1          <0.01

                B                    32.5±3.5

3.4同種粉碎工藝技術(shù)制備不同批次制劑的溶出度穩(wěn)定性比較

表5 愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度比較

樣  品    批   號(hào)            T50/min            P

                       010426            43.5±5.6

               A       010427            48.6±2.6         <0.05

                       010428            58.5±6.2

                       010424            32.8±1.7

                B      010422            33.2±3.4         >0.05

010421            33.0±1.2

4、討論

4.1植物細(xì)胞中的有效成份需經(jīng)過(guò)浸潤(rùn)、溶脹、滲透和擴(kuò)散方能溶出，超細(xì)粉碎技術(shù)一方面可使生

藥細(xì)粉的表面積大大增加，提高藥物的溶出速度，從而有利于藥物的吸收[4]；另一方面超細(xì)粉碎技術(shù)

可使植物藥細(xì)胞破壁率達(dá)90%，從而使植物細(xì)胞中的有效成份直接暴露出來(lái)并進(jìn)入體液，提高其生物

利用度[5]，這是本實(shí)驗(yàn)中超細(xì)粉碎技術(shù)制得的制劑溶出度遠(yuǎn)大于普通粉碎技術(shù)制得的制劑的原因所在。

有關(guān)本實(shí)驗(yàn)制劑的生物利用度有待進(jìn)一步研究。

4.2固體制劑的溶出度與原輔料的物化性質(zhì)、制劑工藝等因素密切相關(guān)，不同廠家因采用不同的原

輔料和生產(chǎn)方法，必然造成溶出度有較大差異，建議應(yīng)通過(guò)研究對(duì)愈風(fēng)寧心片溶出度作出統(tǒng)一的評(píng)價(jià)

標(biāo)準(zhǔn)及控制標(biāo)準(zhǔn)，以此保證其臨床療效。

4.3采用普通粉碎技術(shù)獲得的愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度存在較大差異，原因可能與其獲得的藥

粉不能全部位過(guò)篩有關(guān)，葛根纖維性較強(qiáng)，利用普通粉碎機(jī)不能加工至全部位達(dá)到微米中藥(1～75µm)

的細(xì)度，不僅每次粉碎所得的細(xì)粉在粒度上差異大， 而且在所含組織或部位上亦有差異，進(jìn)而所含有

效成份也就不同；超細(xì)粉碎經(jīng)過(guò)試驗(yàn)確定出全過(guò)篩（200目）粉碎時(shí)間是以藥材全部入

藥為前提的，所以各批次之間差異很小，由此看來(lái)， 利用超細(xì)粉碎技術(shù)獲得的生藥粉制劑，更符合中

醫(yī)處方用藥的要求。

4.4轉(zhuǎn)籃法測(cè)定溶出度通常為每籃放1片，考慮到本實(shí)驗(yàn)含量測(cè)定方法的線性范圍及片劑的葛根素

含量，改為每籃放3片。